
小鼠麻醉指導原則
目的
本文是由ARC獸醫(yī)人(rén)員設計的小鼠麻醉指導原(yuán)則,旨在提供一(yī)般建議。這並不意味著它包含了適用於小鼠的所有可能藥物組合的詳盡列表。具體的麻醉方案應根據特定情況和研究需求(qiú)與所在機構的獸醫合(hé)作製定。
麻醉是(shì)使動物完全或(huò)部分失去感覺,伴隨或不伴隨意識(shí)喪失。動物可能需要麻醉進行手(shǒu)術、可能引起疼(téng)痛的(de)非手(shǒu)術操作,或需要(yào)固定的非疼痛操作。在麻醉前(qián)、麻醉過程中和麻醉後,必須采取措施確保動物的安全和麻醉的(de)有效性。
麻醉可通過胃腸外給藥或吸入給藥的(de)方式進行。藥物(wù)的選擇取決於具體操作、研究目的和其他(tā)因素,如動物的年齡。對於新生小(xiǎo)鼠,有(yǒu)些特別考慮下文進行了(le)概述。如對(duì)藥物選擇有疑問,請谘詢所在機構的獸醫。
01、麻醉的一般指導原則和注意事項(xiàng)
適應期:建議所有(yǒu)動物在運輸後適應一(yī)周,以(yǐ)防止應激引起的反應。動物至(zhì)少需要72小(xiǎo)時才能(néng)恢複到基本(běn)生理狀態。
禁食(shí):由於小鼠(shǔ)無法嘔(ǒu)吐,通常麻(má)醉前無需禁食。然而,如需禁食(例如為了保持體重),因小(xiǎo)鼠的高代謝率(lǜ),禁食時間不應超過(guò)2-3小時。請注意,切勿限製飲水。
眼睛保護:在麻醉狀態下,小鼠的眼睛(jīng)會持續睜開,可能導致(zhì)角膜幹燥和損傷。因此,在如下條件(jiàn)下,應塗(tú)抹眼膏(如Puralube® 或 Lacrilube®)來保護眼睛。
麻醉持續時間超過 5 min;
通過麵罩(zhào)進行麻醉。
監護:無論使(shǐ)用何種麻醉劑,均應監測(cè)麻醉狀態下的小鼠,以確保心髒和呼(hū)吸功能(néng)不被過度抑製,以及麻醉深度適當。
在沒有專用設備的情(qíng)況下,可以監測以下麻醉小鼠的參數:
麻醉深度:通過掐指檢查;
呼吸頻率和模式(shì):正(zhèng)常未受幹(gàn)擾的呼吸率約為 180 bpm,麻醉期間可接受 50% 的緩慢下降速率;
粘膜顏色:應為粉紅色而非藍色或灰色;
體溫:可使用直腸溫(wēn)度計監測體溫,體溫應保持在(zài) 36℃ 以上;
血氧飽和度和(hé)心率:可用專用的齧齒類動物脈搏式血氧儀監測血氧飽和度 (> 95%) 和心率(300-800 bpm);
如對(duì)監護(hù)或監護設備有任何問題,請與所在機構的獸(shòu)醫聯係。
保溫:所有(yǒu)種屬在麻醉狀態下均(jun1)存在(zài)低體溫(wēn)的風險。小鼠由於(yú)體表麵積與體重比高,尤其容易受(shòu)到影響。低體溫對動物會產(chǎn)生(shēng)顯著的(de)生理應激(jī),可能延長恢複時間並有潛在致命風險。
在所有麻(má)醉過程中提供(gòng)額外的(de)保溫措施。
補(bǔ)充熱源包括循環水毯、電熱墊和可在微波或(huò)水浴中加熱的市售產品(如等溫墊或凝膠加(jiā)熱器)。
切勿直接將動物放在(zài)熱源上。
如對使(shǐ)用或購買額外的保溫來源(yuán)有疑(yí)問,請與您所(suǒ)在機構的(de)獸醫聯(lián)係。
補(bǔ)液:在麻醉時間較長或動物患病、老年或虛弱(ruò)的情況下,考慮腹腔或皮下注射溫熱的液體。更多(duō)信息請谘詢您的獸醫。
恢複(fù):持續監測動物直至其完全恢複。
在幹淨的籠子裏,將動物放在紙巾上(不使用墊料)。這樣可以最大程度(dù)地減少氣管阻塞或肺炎的風險。
麻醉後的動物單獨放在一個(gè)籠子裏進行(háng)恢複。
恢複期間繼續提供額外的保溫(wēn)。
當動物能夠走動時,將其送回原籠中子,並提供飼料和(hé)水(shuǐ)。
根據所進行的手術,為了避免同籠夥伴啃縫線或切口處的創傷,小鼠可能(néng)需要在術後階(jiē)段單(dān)獨飼養。任何單獨飼養的計劃都應包括在IACUC方案中,以便進(jìn)行審查和批準。
02、麻醉藥物(wù)和程序
吸入麻醉(zuì)劑: 異氟烷是首選的吸入麻醉劑。 起效快、恢複可靠。
A. 吸入麻(má)醉可以通過滴瓶法、誘導室(shì)、麵罩或氣管插管使用(yòng)精密蒸汽器進行。
i.滴瓶法:
a.請勿使小鼠直接接觸液體吸入麻醉劑(可(kě)通過(guò)在棉花或紗(shā)布上放置不可滲(shèn)透的網格來實現(xiàn))。
b. 由於無法控製室內的麻醉劑濃度,並且濃度可能(néng)迅速達到有毒水平,因此該方法僅(jǐn)適(shì)用於非常短的手術,如(rú)尾部活檢、皮下腫瘤植入或麵罩麻醉前的(de)誘導。
ii.誘導(dǎo)室、麵罩和氣管插管:
a.這些需要配備氧氣源和精密蒸發器(qì)的(de)氣(qì)體麻醉機。一些研究單(dān)位(wèi)可能使用室內空氣而不是純氧作為氣源,這也(yě)是(shì)可(kě)接受的。
b.蒸發器必須與特定的吸入麻醉劑兼容。
c.由於小鼠呼(hū)吸能力(lì)較小,使用非循環呼吸係統。
iii. 當使用吸入性麻醉時,使用通(tōng)風櫃或配備氣體清除係統的麻醉係統,以盡量減少職業暴(bào)露於排出氣體。
B. 注射麻醉劑:氯胺酮(tóng)/賽拉嗪聯合使(shǐ)用(yòng)是小鼠的首選注射麻醉劑(jì)。
下麵列出了其他常用的注射劑。
i. 小鼠對各種麻醉藥的敏感性差異顯著。 年齡(líng)、體質、品係、健康狀況、基因調控(kòng)和性別等因素都可能影響麻醉敏感性。以下劑量僅(jǐn)為一般指導原則,基(jī)於上述因素可能存在顯著差異。在(zài)您的方案中添加麻醉劑時,建議提供一個範圍,以允許根據每隻動物的特定需求進行給藥。
ii. 不建議在(zài)小鼠中進行肌(jī)肉注射(IM),因(yīn)為可能導致組織刺激(jī)、跛行和自殘等並發症。
*一(yī)個很好的初始方(fāng)案是 100 mg/kg 氯(lǜ)胺酮和 7 mg/kg 塞拉嗪。
**阿替美唑(5 mg/mL)是右美(měi)托咪定(0.5 mg/mL)濃度的 10 倍。
您需要 4-6 倍於右美托咪定體積的阿替美唑(5 mg/mL)來逆轉右美托咪定。然而,阿替美(měi)唑的安全(quán)範圍非常高,因此如果逆轉非常緊急,給予右美托咪定(dìng)等體積的阿替美唑,可使阿替(tì)美唑(zuò)的劑量增加 10 倍,這是安全的。
同樣,使用與塞拉嗪(20 mg/mL)等(děng)體積的阿替美唑 (5 mg/mL) 逆轉也有效。雖然塞拉嗪具有更(gèng)高的濃度(20 mg/mL),但阿替美唑(5 mg/mL)更純淨,且與α2 受體結合更緊密,因此(cǐ)等體積(jī)逆轉塞拉嗪也可行(háng)。
C. 注(zhù)射麻(má)醉劑的一種類(lèi)型是局部麻醉劑。
i. 局麻藥通過(guò)特異(yì)性結合(hé)神經細胞膜上的電壓門控 Na + 通道來阻斷神經衝動。
ii. 給藥途徑包括粘(zhān)膜(鼻、眼等)局部給藥或直接注射到組織和神經束周圍。
iii. 在疼痛刺激(如切口)之前給予局部麻醉劑(jì)被認為是輔助鎮痛藥(yào)物,與阿片類和 非甾體抗炎藥(NSAID)一起使用。
iv. 由於持(chí)續時間較(jiào)短(數小時),不鼓勵將局(jú)部(bù)麻醉劑作為主(zhǔ)要鎮痛(tòng)藥物使用,
03、對小鼠麻醉的特殊考慮:仔鼠麻醉
目前文獻中描述了幾種適(shì)用於新生齧齒(chǐ)動物的麻(má)醉方(fāng)法,包括注射麻醉、吸入(rù)麻醉和低溫麻醉(zuì)。
新生齧齒動物的(de)麻醉會導致親代啃食後代的問題。可通過確保新生仔鼠完全恢複後再歸還給母鼠來減(jiǎn)少這種情況。其他措施包括讓幼仔接觸來自於母鼠籠中的汙染(rǎn)墊料,並將幼仔放(fàng)在窩仔(zǎi)中間位置(zhì)。
低溫麻醉
低溫麻醉隻適用於(yú)7日齡以下的新生齧齒動物,並且不應(yīng)用於持續時間超過(guò)30分鍾(zhōng)的手術。
動物不應直接置於冰上(在(zài)動物和底層(céng)冰浴之間使用乳膠手套或其他物質)。
當足部反(fǎn)射消(xiāo)失時,動物已達(dá)到適當的麻醉水平。
手(shǒu)術過程中請(qǐng)勿使用白熾燈(dēng),因為它(tā)會使手術區域變熱,導致動物從手術麻醉狀態中蘇(sū)醒。
麻醉(zuì)後,動物應緩慢複溫。快速升溫可能(néng)會導致組織損傷。可(kě)使用循環水毯、加熱(rè)墊 (40℃) 或培養(yǎng)箱 (33℃) 中給動物重新升(shēng)溫。
幼仔(zǎi)能夠在無(wú)直接物理刺激(jī)的情況(kuàng)下移動後,可將其歸(guī)還給母鼠。
吸入麻醉
新生齧齒動物可能比成(chéng)年(nián)齧(niè)齒動物需要(yào)更長的吸入麻醉誘(yòu)導時間。
在麻醉盒中進行誘導(dǎo)通常(cháng)需 5% 異氟(fú)烷,維持(麻醉誘(yòu)導(dǎo)盒或鼻錐)需 1-2%(流速 = 0.3-0.6 L/min)。
注射麻醉
氯胺酮/塞拉嗪是 7 日齡以上小鼠的推(tuī)薦注射(shè)麻醉劑:通過 27g 針頭(tóu) IP 注射 50-150 mg/kg 氯胺酮(tóng)和 5-10 mg/kg 塞拉嗪(最大體積 = 0.5 mL)。
對於7日齡以上的小鼠,推薦使用氯胺酮/塞拉嗪(qín)作為注射麻(má)醉劑:使用27g針頭(tóu)腹腔注射(shè)50-150 mg/kg氯胺酮和5-10 mg/kg塞拉嗪(最大體(tǐ)積=0.5 ml)。